目镜图像的重合一致：
手术显微镜各目镜中图像应当重合一致。其中主要是双目实体显微镜，手术者两眼所见图像的重合性要好。检测办法：用显微镜中的1对目镜的任何1个，将其视度调节在0位上，以单眼观察。在物象位置上，放一张划有“十字线”的白纸，调整后使“十字线”达至最清晰。移动白纸将“十字线”的交叉点位于目镜视场中心。在“十字线”与视场边缘的4个交接处，划4条线，再观察另一目镜应位于同一位置，双眼同时观察时，则应完全重合。
照明与清晰度： 照明应聚光良好均一，照明区与显微镜的视场需重合一致。光源的物理性能应适应手术的需要，在较长手术期间，光源不应使创面受到损伤。应具备同轴照明，因同轴照明不仅可在手术时排除阴影，而且可利用眼底反光来辨别其他微小物体。照明光线的亮度必须充足，至少要清晰地分辨出11-0线，以及缝合后线的状况。尤其是需要高倍放大的情况下，更需要较强的光线。目前大多采用冷光源和光导纤维来实现较强的亮度。
①内光源——光源组合于显微镜内，照射方向与显微镜同轴，适用于深部组织的照明。 ②外光源——光源位于显微镜外，分为同轴和不同轴照明系统两种。为了使物体面具有足够的照明度，光源大多采用卤素灯或将光导纤维引入显微镜中，并通过物镜射向术野。某些手术显微镜同时具有内外两种照明系统，以及带有裂隙灯显微镜的照明系统。高质量的眼科手术显微镜具有完全同轴的光源。
适度的景深范围
手术显微镜要求对术中较浅或较深部位均能观察清楚，立体感强。在深浅范围不大的情况下操作，不需要调整焦距。因此，对手术显微镜应有一定范围的景深要求。 主镜与显微镜主体呈45°，而助手镜与显微镜主体呈30°。调整显微镜焦距时，应使目镜视场中心处最清晰为止。
放大倍率的调整
作眼科显微手术时，术中不同阶段或不同部位需不同的放大倍率。因此，最好选择能够连续变倍的显微镜。若能用脚踏控制板迅速放大或缩小倍率，既可节省时间，又能方便手术操作。要求放大倍率不低于5倍。 手术视野（简称术野） 手术显微镜应有较宽的视野。在4~6倍（X）下，视野范围为35~50 mm。这样大的镜下视野，在缝线结扎时尤为重要。手术显微镜放大倍数越大，术野将相应地缩小。
工作空间与操作距离
手术显微镜应符合工效学要求。物镜与术野的空间距离主要依赖于物镜焦距的长短。工作空间低于150 mm时，手术器械易触碰到显微镜；高于200 mm时，使身材矮小的手术者操作不舒适。手术者的眼离术野的距离一般为350~400 mm。合适的工作距离，使手术者舒适而不易疲劳，能较长时间连续地工作。
显微镜的移动和调焦
手术中，可通过脚踏控制板使手术显微镜升降，以调整焦距。手术显微镜附设X-Y轴移动装置，可做前后或左右移动。 控制系统 手术显微镜的控制操纵系统最好是全自动化。显微镜在升降、微调、变倍或移位时，应稳定可靠、无噪声和不震动。
机械连接
由于手术显微镜是由多部件连接而成，因此要求它的底座、立柱、横臂及各活动连接处应坚固稳定，调节灵敏。当横臂在升降时，显微镜应无颤动感。整机推移轻便，锁定装置可靠。